蛋白A的優勢在于其高流速和強結合能力，適合大規模抗體純化。局限性包括非特異性結合和在特定條件下的穩定性問題。

通過重組表達去除N端白蛋白結合結構域后，蛋白G的血清蛋白結合水平降低，從而減少了非特異性結合，提高了純化效率。

蛋白L適用于抗體片段的純化以及那些不能被蛋白A和G有效結合的抗體亞型，如一些人源kappa輕鏈抗體。

主要區別在于PAM識別和切割末端。As Cas12a識別5'-TTTV PAM序列并產生交錯末端，而Cas9識別5'-NGG PAM序列并產生平末端。交錯末端在某些應用中更有利于DNA序列的精確方向整合。

As Cas12a(Cpf1)與crRNA形成的核糖核蛋白（RNP）轉移到細胞中，更安全、快速，脫靶效應低，編輯效率高，逐漸成為CRISPR基因編輯的有效方式。

推薦將As Cas12a(Cpf1)核酸酶與Cas12a crRNA以等摩爾量結合。C末端帶有SV40 NLS和nucleoplasmin NLS兩個核定位信號，以及TEV蛋白酶切位點和6xHis標簽，以確保最佳編輯效果。

人源基因敲除質粒是一種用于基因編輯技術的載體，通過構建并轉染細胞，可以模擬特定基因的缺失或突變，從而研究該基因在疾病發生中的作用。

所有sgRNA文庫細胞pool構建完成后都會通過NGS檢測覆蓋度，保證產品質量。

微生物CRISPR文庫在生物醫學研究、癌癥治療、農業改良、遺傳性疾病治療以及微生物基因功能研究等多個領域都有重要的應用。

分子育種：家畜和家禽的基因篩查有助于了解與其生長、繁殖、疾病、肉質等關鍵經濟性狀相關的分子機制。

CRISPR基因篩選系統為分子育種提供了大規模篩選的工具，推動了高效、多維度篩選工作的可行性。

抗病育種：利用豬全基因組CRISPR敲除文庫篩選與病毒感染相關的宿主因子，如PDCoV、ASFV等，為制備抗病毒遺傳修飾豬提供了新的靶標。通過研究豬對乙型腦炎病毒(JEV)等疾病的抗性，為豬的抗病育種工作帶來了新的方向。

疾病研究：利用豬全基因組CRISPR敲除文庫篩選與病毒感染相關的宿主因子，有助于了解病毒的感染機制，尋找有效的防控措施。篩選出的與病毒感染相關的宿主因子，如腸道黏膜屏障相關基因、細胞因子和炎癥相關基因、病毒受體相關基因等，為疾病的治療和預防提供了新的思路。

分子育種：雞全基因組敲除文庫為分子育種提供了大規模篩選的工具，推動了高效、多維度篩選工作的可行性。通過精準地敲除或編輯與生長、繁殖、疾病、肉質等關鍵經濟性狀相關的基因，有助于深入了解這些性狀的分子機制，并可能通過遺傳改良優化家禽的生產性能。

基因功能研究：雞全基因組敲除文庫為基因功能研究提供了豐富的工具，可以快速、準確地定位并研究基因的功能。通過敲除特定基因，可以觀察其在生物體中的表達模式、調控機制以及與其他基因的相互作用關系，從而揭示基因在生命活動中的作用。

可用于藥物開發、基因功能研究、疾病模型建立、基因編輯和基因治療以及復雜生物系統解析等多個領域