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CRISPR sgRNA文庫定制化

研究基因在代謝通路或某些特定疾病發(fā)生過程中的功能，對于疾病機理研究及藥物研發(fā)具有非常重要的意義。新一代基因編輯技術(shù)CRISPR以其操作簡單和通用的獨特優(yōu)勢，成為開展正向遺傳學(xué)篩選實驗強有力的工具。利用CRISPR技術(shù)建立可能與某類功能相關(guān)的突變體庫，通過功能性篩選和富集、PCR擴增及深度測序分析，確認(rèn)與這類功能相關(guān)的基因。

泓迅生物利用獨創(chuàng)的“GPS”（Genotype，Phenotype，Synotype）平臺，提供基于CRISPR sgRNA文庫的一站式基因功能篩選服務(wù)。我們專利的Syno^?合成技術(shù)平臺，可以快速高效地實現(xiàn)sgRNA文庫構(gòu)建，并包裝成慢病毒混合文庫后轉(zhuǎn)染細(xì)胞。結(jié)合高通量/高內(nèi)涵篩選平臺，利用控制細(xì)胞存活、結(jié)合免疫染色、流式細(xì)胞術(shù)等手段篩選得到所需細(xì)胞，最終通過測序等方法推斷出發(fā)揮作用的靶基因。

服務(wù)優(yōu)勢

針對客戶需求的模式物種進行sgRNA設(shè)計
自由選擇sgRNA表達載體，提供轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒
提供從sgRNA設(shè)計、文庫構(gòu)建到慢病毒包裝的一站式服務(wù)

服務(wù)詳情

服務(wù)項目	服務(wù)詳情	周期
sgRNA設(shè)計	針對特定基因分類進行g(shù)RNA序列設(shè)計每個基因設(shè)計3-6條sgRNA	1-2周
芯片合成	將所設(shè)計的所有sgRNA及陰性對照合成在一張芯片上	3-4周
sgRNA文庫構(gòu)建	將sgRNA構(gòu)建到客戶的目標(biāo)載體上	2-3周
文庫質(zhì)粒大抽	根據(jù)發(fā)貨量進行轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒抽提	1周
文庫質(zhì)檢及NGS驗證(可選)	1. 克隆覆蓋倍數(shù)必須大于100倍 2. 克隆正確率大于70% 3. NGS驗證的文庫正確率大于99% 4. NGS驗證文庫的均一性指標(biāo)小于10	2-3周
病毒包裝(可選)	慢病毒包裝，病毒滴度: 10⁸TU/ml	2-3周
總計		11-16周