多克隆抗體特點：

1.識別任一抗原上的多個表位，所得血清為異質性抗體混合物，親和力各有不同

2.主要有IgG亞類組成
3.通常使用多肽免疫原制備以獨有表位為靶標的多克隆抗體，尤其是針對高同源性蛋白家族

優劣勢：

1. 高親和性：由于靶蛋白上的多個表位能夠結合不止一個抗體分子，多抗可放大低表達水平靶蛋白的信號
2.可識別多個表位，有利于免疫沉淀和染色質免疫沉淀實驗獲得更好的結果
3.與相似抗原有更多交叉反應，可放大低表達信號，染色背景干擾較高
4.對微小抗原變化的包容性更強，可檢測同源性的蛋白家族

單克隆抗體特點：

1. 識別一個抗原上的單一抗原表位
2.僅由一種抗體亞型組成（IgG1、IgG2、IgG3）如需使用二抗進行檢測，應針對正確的亞類選擇抗體

優劣勢：

1.高特異性：單抗適用于實驗中的一抗，產生背景染色信號通常顯著低于多克隆抗體
2.與多抗相比，同質性較高，結果重現性較高
3.特異性地檢測一個靶表位，不易與其它蛋白發生交叉反應，染色背景干擾低
4.檢測單一抗原或蛋白質家族的單一成員

用于生產抗體的宿主具有許多種,最常見的兩種是小鼠和兔子。小鼠通常是用于產生單克隆抗體的宿主,具有免疫周期較短、成本較低等優勢。小鼠抗體可用于早期發現研究，體內臨床前治療研究,體外診斷。與小鼠相比,兔子具有較高的成功率和更廣泛的抗原適應范圍。兔子抗體可以識別更多種類的表位,與小鼠抗體相比具有更高的親和力和特異性。

減少免疫原性、保持親和力和特異性、提高臨床應用的安全性和有效性

抗體設計涉及到多個方面，包括免疫原的設計、免疫過程的優化、目的抗體篩選、抗體純化、應用鑒定等。免疫原可以是天然蛋白、重組蛋白、多肽或DNA。設計免疫原時，需考慮免疫原分子的特點和抗體的應用，以確定使用哪種類型的免疫原和免疫原的序列。

抗體發現的方法包括噬菌體展示技術、雜交瘤技術等。其中，噬菌體展示技術是一種將外源蛋白或多肽的編碼基因插入到噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置，使外源基因隨外殼蛋白的表達而表達，同時，將外源蛋白或多肽展示在噬菌體表面，進而實現蛋白或多肽與相應受體結合的技術。

原理不同：

5’RACE是在低豐度轉錄本中快速擴增cDNA的5’端

多重PCR與普通PCR相同

擴增區域：

5’RACE可擴增區域為CDR1-3

多重PCR可擴增區域為CDR3

疫苗的設計與評估、腫瘤診斷、自身免疫性疾病等

雜交瘤細胞測序相較于直接對抗體進行基于蛋白質分析的測序相比,提供更準確更可靠的結果,防止蛋白測序中如亮氨酸/異亮氨酸較難區分等潛在風險。

經過雜交瘤測序,可以獲得相應的序列,在后續項目中有需要用到單克隆抗體的時候,可以利用測得的基因序列進行重組抗體的制備。解決了雜交瘤保存過程中,細胞死亡或高特異性丟失的問題。

慢病毒包裝系統有兩種不同。第一，第二代系統由編碼HIV蛋白gag、pol、rev和tat的包膜質粒和包裝質粒組成。第三代系統需要一個包膜質粒和兩個包裝質粒，一個編碼gag和pol，另一個編碼rev；第二，第三代包裝系統修改了轉移質粒的5'LTR，以消除對HIV-Tat蛋白的需要，因此被認為更安全。

第二代轉移質粒必須用第二代系統包裝，因為野生型5'LTR啟動子需要Tat才能發揮作用。第三代質?？墒褂萌我幌到y包裝。

1. 無包膜病毒：腺病毒是一種沒有包膜的病毒，這使得它在包裝過程中較為穩定，易于制備出高滴度的病毒。

2. 外源基因包裝容量大：腺病毒具有較大的外源基因包裝容量，可以包裝約8kb的外源基因，這使得它成為基因治療等領域的重要載體。

3. 廣泛的宿主范圍：腺病毒能夠感染處于分裂或未分裂的細胞，具有廣泛的宿主范圍，包括人類和其他動物細胞。

4. 基因組穩定：腺病毒的基因組穩定，可在未分裂的細胞中存在數年且不與宿主發生整合，這減少了基因突變和致癌的風險。

5. 較為安全：相對于皰疹病毒或逆轉錄病毒等其他病毒載體，腺病毒不會導致嚴重的人類疾病，因此在臨床應用中較為安全。

6. 強烈的免疫應答：腺病毒可通過特定的整合素進入樹突狀細胞，相對于其他病毒載體和DNA載體，它能夠刺激更強的免疫應答，這在疫苗研究和免疫治療中具有潛在優勢。

AAV在多種細胞類型中具有較高的轉染效率，包括難以轉染的原代細胞和神經細胞。不同的AAV血清型對不同細胞和組織的轉染效率有所不同。