生物發(fā)光成像是生物醫(yī)藥領(lǐng)域在二維/三維乃至四維尺度內(nèi)研究組織、細(xì)胞和亞細(xì)胞成分的強(qiáng)有力方法,也是活體動(dòng)物進(jìn)行無(wú)創(chuàng)、實(shí)時(shí)追蹤細(xì)菌和腫瘤檢測(cè)的最佳選擇。有研究采用大腸桿菌 Nissle 1917 (Escherichia coli Nissle 1917,EcN)為底盤(pán)細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)了單次注射對(duì)腫瘤長(zhǎng)達(dá) 12 天的精準(zhǔn)成像。EcN 作為大腸桿菌種唯一一株益生菌,鑒于其長(zhǎng)期而安全的人類(lèi)給藥記錄和腫瘤特異性定植特性與原位激活多種前體藥物特性,EcN已成為合成生物學(xué)應(yīng)用中首選“底盤(pán)”之一,用于工程治療細(xì)菌對(duì)抗感染、代謝疾病、胃腸道炎癥性疾病和癌癥。
EcN作為益生菌菌株可以選擇性在腫瘤位置富集,多項(xiàng)研究將其作為抗癌藥物或治療基因的載體或平臺(tái)。泓迅生物參考多篇Nature文獻(xiàn)綜合篩選出幾種不同顏色的代表熒光蛋白(Fluorescent Proteins, FP),以質(zhì)?;蚧蚪M整合的方式,將EcN改造為自發(fā)表達(dá)FPs的熒光菌株。多樣的改造菌株覆蓋了從藍(lán)色到紅色的光譜區(qū)域,極大滿(mǎn)足了科研人員對(duì)于定位、原位成像和追蹤等方面不同的需求。
熒光蛋白 | 熒光顏色 | 最大激發(fā)波長(zhǎng)(nm) | 最大發(fā)射波長(zhǎng)(nm) | 亮度 |
---|---|---|---|---|
miRFP713 | Near-infrared | 690 | 713 | 6.3 |
mTagBFP2 | Blue | 399 | 454 | 36.48 |
mTurquoise2 | Cyan | 434 | 474 | 28.52 |
mCitrine | Yellow | 516 | 529 | 88.80 |
mOrange2 | Orange | 549 | 565 | 40.88 |
mCherry | Red | 587 | 610 | 25.50 |
EGFP | Green | 448 | 507 | 45.88 |
注:不同類(lèi)型的FPs具有不同的應(yīng)用場(chǎng)景:EGFP、mCherry等適合細(xì)菌單獨(dú)成像,或者細(xì)菌互作細(xì)胞或者細(xì)菌感染動(dòng)物模型淺層組織成像等;iRFP近紅外熒光蛋白,適合細(xì)菌干擾動(dòng)物模型,深層組織器官活體成像等。
Fluorescent proteins | Host Strains | Types | Promoter |
---|---|---|---|
miRFP713 | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC;Constitutive promoter EM7 |
mTagBFP2 | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC;Constitutive promoter EM7 |
mTurquoise2 | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC;Constitutive promoter EM7 |
mCitrine | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC;Constitutive promoter EM7 |
mOrange2 | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC;Constitutive promoter EM7 |
mCherry | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC;Constitutive promoter EM7 |
EGFP | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC;Constitutive promoter EM7 |